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Avertissement:
les champignons hallucinogènes ne sont pas une drogue récréative et leurs effets peuvent être très violents.
Il ne faut jamais les prendre à la légère, éviter surtout lors des premières prises d'être seul, se faire surveiller par une personne de confiance qui n'en a pas pris
Salut ,
je vous propose un petit guide en images pour la réalisation d'une culture liquide.
Une culture liquide, comme son nom l'indique, est une culture de mycélium dans un substrat liquide.
Cette culture peut permettre d'ensemencer des centaines de pots soit de type PF Tek ou alors, comme je le montrerai dans un autre guide, de graines (seigle, maïs, graines pour oiseaux...) en partant d'une empreinte de spores ou d'une seringue de spores.
De plus avec la culture liquide la colonisation est explosive, beaucoup plus rapide qu'en partant de spores.
Elle se conserve aisément au réfrigérateur(pour ma part j'ai stocké des pots de culture liquide près de 2 ans sans soucis.
matériel nécessaire :
-- une empreinte de spores ou une seringue de spores
-- une seringue stérile de cinq à 20 ml avec une grosse aiguille(pharmacie)
-- du miel clair si possible, type acacia (qui peut être remplacé par du sirop de fraise)
-- un pot, style pot de confiture, compote
-- de l'eau du robinet
-- une bille en verre(non obligatoire)
-- du sparadrap microporeux(en pharmacie) ou du polyfil(filtre pour aquarium, en animalerie)
--une cocotte minute et son panier vapeur
Verser 96 ml (100 ml pour les fainéants) d'eau dans le bocal, ou deux fois 96 ml, trois fois...
à l'aide de la seringue rajouter 4 ml de miel(ou deux fois, trois fois, selon la quantité d'eau) que vous aurez au préalable rendu liquide, afin de pouvoir l'aspirer avec la seringue,en le passant quelques secondes au micro-ondes.
si vous disposez d'une bille, rajoutez-la dans le pot, elle servira à briser plus facilement le mycélium afin de pouvoir l'aspirer dans une seringue.
à l'aide d'un couteau,ou d'un tournevis,percer un trou dans le couvercle.
si vous disposez de sparadrap microporeux, recouvrez le trou à l'aide de celui-ci
si vous disposez de polyfil, agrandissez le trou jusqu'à un diamètre d'un demi centimètre
prenez une grosse boule de polyfil, je faites la passer dans le trou comme sur la photo
refermez le couvercle et recouvrez le pot avec de l'aluminium
STERILISATION :
prenez une cocotte-minute(indispensable), mettez 3 à 4 cm d'eau dans le fond, installez le support du panier vapeur, puis le panier vapeur, et posez votre pot verticalement dans celui-ci.
Fermez la cocotte-minute, mettez la sur feu fort jusqu'à ce que la vapeur s'échappe de la soupape.
À ce moment-là réduisez le feu,et comptez 20 minutes.
Au bout de 20 minutes, enlever la cocotte-minute du feu et laissez-la refroidir complètement plusieurs heures(idéalement une nuit).
Erratum de Dad- : Dans pas mal de tentatives de CL, il a été noté que 20 minutes de stérilisation sont insuffisantes.
Donc, n'hésitez pas à stériliser vos Cultures Liquides pendant 1 heure.
EDIT gnuhhh :
A mon avis, et suite à mes nombreux tests, je persiste et pour être large mon temps de stérilisation ne dépasse pas 25mn, 30mn grand maximum.
Au delà le risque est la caramélisation des sucres du miel ou du sirop.
Je précise bien que les 25mn sont bien à partir du moment où la cocotte est à bonne température, c’est à dire une fois que la soupape chuchote.
Une petite astuce pour être certain que la température à l’intérieur de la cocotte soit bien atteinte (112°C environ) il suffit de faire tomber sur le couvercle quelques gouttes d'eau et, si la température est bonne, elles doivent se mettre à bouillir et à se vaporiser immédiatement.
INOCULATION de votre culture liquide :
dans cette étape, la propreté et la stérilité de vous-même et de vos instruments est primordiale.
Dans l'idéal, prenez une douche, et lavez-vous les mains, ensuite frictionnez-les à l'alcool,au gel désinfectant ou à l'eau de Javel diluée.
Ne fumez pas !!! L'alcool et le gel désinfectant sont hautement inflammables !
Travaillez dans une pièce sans courant d'air (fenêtres et portes fermées)
Préparez un plan de travail propre(table), passez le si possible à l'alcool à 70°, éventuellement à l'alcool à brûler, posez sur votre plan de travail votre pot recouvert d'aluminium, un scalpel ou un couteau désinfectés à l'alcool, votre empreinte de spores.
Si vous disposez d'un masque mettez le, ou à défaut enveloppez votre bouche et votre nez dans un foulard ou un tissu propre.
Pour prévenir toute contamination, il va falloir travailler rapidement.
Enlevez l'aluminium de votre pot, dévissez le couvercle sans le soulever, ouvrez votre empreinte de spores et à l'aide du scalpel grattez la.
Il n'est absolument pas nécessaire de gratter toute l'empreinte, l'essentiel étant d'avoir quelques spores sur votre scalpel
soulevez rapidement votre couvercle, et tapez votre scalpel contre le bord du pot afin de faire tomber les spores dans le liquide.
Ne cherchez pas faire tomber toutes les spores afin de ne pas laisser le couvercle entrouvert trop longtemps.
Il y a des millions de spores sur votre scalpel et il en tombera bien assez dans votre pot.
Refermez rapidement votre pot et agitez le légèrement en veillant à ne pas mouiller le polyfil ou le sparadrap du couvercle.
Si vous disposez d'une seringue de spores, il suffit d'injecter par le trou au travers du polyfil ou du sparadrap, 1 à 2 millilitres de la solution sporée,en n'oubliant pas de désinfecter l'aiguille et le point d'inoculation avec de l'alcool si vous utilisez du sparadrap.
Recouvrez d'une deuxième couche de sparadrap après injection.
Replacez l'aluminium sur le pot, et entreposer celui-ci au noir et au chaud(25° Celsius idéalement), mais la température ambiante d'une pièce convient également.
Afin d'améliorer la stérilité, et si vous disposez d'une cuisinière à gaz, sachez qu'autour de la flamme il existe un cône de stérilité d'une vingtaine de centimètres et qu'il vous est possible d'effectuer des manipulations précédentes à proximité de ladite flamme.
Encore une fois le mélange flamme/alcool est explosif,méfiance !
Laissez faire le temps, et au bout de quelques jours vous devriez voir la formation d'un nuage de mycélium.
au fur et à mesure que le mycélium grandit, la culture liquide a tendance à pâlir.
Contaminations
Toute apparition d'un trouble, de particules en suspension, de bulles, encore plus de moisissures vertes ou colorées signe la contamination de votre culture liquide. Dans ce cas, injecter une bonne dose d'eau de Javel, laisser reposer quelques minutes et jeter votre culture liquide aux toilettes.
Exemple de cultures liquides contaminées
Votre culture liquide est maintenant prête et vous pouvez en prélever à l'aide d'une seringue avec une aiguilles de gros diamètre en passant soit par le polyfil, soit par le trou recouvert de sparadrap microporeux(dans ce cas passer le sparadrap à l'alcool avant de piquer)et en ayant soin de recouvrir le trou de prélèvement par une deuxième couche de sparadrap immédiatement après prélèvement.
une seringue de 20 ml de culture liquide permet d'ensemencer une vingtaine de pots à raison d'1 ml par pot.
Veillez à bien agiter la seringue avant utilisation.
Veillez également à bien désinfecter l'aiguille en la chauffant au rouge ou en la passant à l'alcool avant d'inoculer un pot.
Conservation de la culture liquide :
le pot de culture liquide ainsi que les seringues contenant de la culture liquide se conservent plusieurs mois, voire années au réfrigérateur.
Variantes dans la réalisation des cultures liquides :
Le silicone
la culture liquide n'a pas besoin d'une grande quantité d'oxygène pour se développer, il n'est donc pas indispensable d'utiliser du polyfil ou du sparadrap microporeux qui servent juste à favoriser les échanges gazeux.
il est possible de boucher le trou de prélèvement à l'aide de silicone résistant à la température.
Cela facilite le secouage de la solution et le morcellement du mycélium afin de faciliter le prélèvement, ce qui est très pratique si l'on ne dispose pas d'aiguilles très grosses.
Avec le silicone, il n'est pas besoin d'utiliser une bille.
En cas d'utilisation du silicone, il est impératif de veiller avant stérilisation, à ne pas visser complètement et hermétiquement le couvercle.
Dans le cas contraire, en refroidissant, il se créerait un vide dans le pot et lors de l'ouverture de celui-ci pour introduire les spores, il y aurait un important appel d'air qui risquerait d'introduire des contaminants.
Il faut donc, visser complètement le couvercle après complet refroidissement sans enlever l'aluminium.
Bien évidemment le prélèvement s"effectue alors en piquant l'aiguille au travers du silicone.
Petit conseil: dans ce cas l'étanchéité est totale et pour éviter tout phénomène de vide se créant à l'intérieur du pot et rendant l'aspiration difficile, je vous conseille d'injecter dans le pot la même quantité d'air stérile que le volume de culture liquide à soutirer.
Pour avoir de l'air stérile, vous pouvez mettre le bout de votre aiguille dans une flamme et aspirer doucement.
A venir: Le biberon à tétine inversée...
les champignons hallucinogènes ne sont pas une drogue récréative et leurs effets peuvent être très violents.
Il ne faut jamais les prendre à la légère, éviter surtout lors des premières prises d'être seul, se faire surveiller par une personne de confiance qui n'en a pas pris
Salut ,
je vous propose un petit guide en images pour la réalisation d'une culture liquide.
Une culture liquide, comme son nom l'indique, est une culture de mycélium dans un substrat liquide.
Cette culture peut permettre d'ensemencer des centaines de pots soit de type PF Tek ou alors, comme je le montrerai dans un autre guide, de graines (seigle, maïs, graines pour oiseaux...) en partant d'une empreinte de spores ou d'une seringue de spores.
De plus avec la culture liquide la colonisation est explosive, beaucoup plus rapide qu'en partant de spores.
Elle se conserve aisément au réfrigérateur(pour ma part j'ai stocké des pots de culture liquide près de 2 ans sans soucis.
matériel nécessaire :
-- une empreinte de spores ou une seringue de spores
-- une seringue stérile de cinq à 20 ml avec une grosse aiguille(pharmacie)
-- du miel clair si possible, type acacia (qui peut être remplacé par du sirop de fraise)
-- un pot, style pot de confiture, compote
-- de l'eau du robinet
-- une bille en verre(non obligatoire)
-- du sparadrap microporeux(en pharmacie) ou du polyfil(filtre pour aquarium, en animalerie)
--une cocotte minute et son panier vapeur
Verser 96 ml (100 ml pour les fainéants) d'eau dans le bocal, ou deux fois 96 ml, trois fois...
à l'aide de la seringue rajouter 4 ml de miel(ou deux fois, trois fois, selon la quantité d'eau) que vous aurez au préalable rendu liquide, afin de pouvoir l'aspirer avec la seringue,en le passant quelques secondes au micro-ondes.
si vous disposez d'une bille, rajoutez-la dans le pot, elle servira à briser plus facilement le mycélium afin de pouvoir l'aspirer dans une seringue.
à l'aide d'un couteau,ou d'un tournevis,percer un trou dans le couvercle.
si vous disposez de sparadrap microporeux, recouvrez le trou à l'aide de celui-ci
si vous disposez de polyfil, agrandissez le trou jusqu'à un diamètre d'un demi centimètre
prenez une grosse boule de polyfil, je faites la passer dans le trou comme sur la photo
refermez le couvercle et recouvrez le pot avec de l'aluminium
STERILISATION :
prenez une cocotte-minute(indispensable), mettez 3 à 4 cm d'eau dans le fond, installez le support du panier vapeur, puis le panier vapeur, et posez votre pot verticalement dans celui-ci.
Fermez la cocotte-minute, mettez la sur feu fort jusqu'à ce que la vapeur s'échappe de la soupape.
À ce moment-là réduisez le feu,et comptez 20 minutes.
Au bout de 20 minutes, enlever la cocotte-minute du feu et laissez-la refroidir complètement plusieurs heures(idéalement une nuit).
Erratum de Dad- : Dans pas mal de tentatives de CL, il a été noté que 20 minutes de stérilisation sont insuffisantes.
Donc, n'hésitez pas à stériliser vos Cultures Liquides pendant 1 heure.
EDIT gnuhhh :
A mon avis, et suite à mes nombreux tests, je persiste et pour être large mon temps de stérilisation ne dépasse pas 25mn, 30mn grand maximum.
Au delà le risque est la caramélisation des sucres du miel ou du sirop.
Je précise bien que les 25mn sont bien à partir du moment où la cocotte est à bonne température, c’est à dire une fois que la soupape chuchote.
Une petite astuce pour être certain que la température à l’intérieur de la cocotte soit bien atteinte (112°C environ) il suffit de faire tomber sur le couvercle quelques gouttes d'eau et, si la température est bonne, elles doivent se mettre à bouillir et à se vaporiser immédiatement.
INOCULATION de votre culture liquide :
dans cette étape, la propreté et la stérilité de vous-même et de vos instruments est primordiale.
Dans l'idéal, prenez une douche, et lavez-vous les mains, ensuite frictionnez-les à l'alcool,au gel désinfectant ou à l'eau de Javel diluée.
Ne fumez pas !!! L'alcool et le gel désinfectant sont hautement inflammables !
Travaillez dans une pièce sans courant d'air (fenêtres et portes fermées)
Préparez un plan de travail propre(table), passez le si possible à l'alcool à 70°, éventuellement à l'alcool à brûler, posez sur votre plan de travail votre pot recouvert d'aluminium, un scalpel ou un couteau désinfectés à l'alcool, votre empreinte de spores.
Si vous disposez d'un masque mettez le, ou à défaut enveloppez votre bouche et votre nez dans un foulard ou un tissu propre.
Pour prévenir toute contamination, il va falloir travailler rapidement.
Enlevez l'aluminium de votre pot, dévissez le couvercle sans le soulever, ouvrez votre empreinte de spores et à l'aide du scalpel grattez la.
Il n'est absolument pas nécessaire de gratter toute l'empreinte, l'essentiel étant d'avoir quelques spores sur votre scalpel
soulevez rapidement votre couvercle, et tapez votre scalpel contre le bord du pot afin de faire tomber les spores dans le liquide.
Ne cherchez pas faire tomber toutes les spores afin de ne pas laisser le couvercle entrouvert trop longtemps.
Il y a des millions de spores sur votre scalpel et il en tombera bien assez dans votre pot.
Refermez rapidement votre pot et agitez le légèrement en veillant à ne pas mouiller le polyfil ou le sparadrap du couvercle.
Si vous disposez d'une seringue de spores, il suffit d'injecter par le trou au travers du polyfil ou du sparadrap, 1 à 2 millilitres de la solution sporée,en n'oubliant pas de désinfecter l'aiguille et le point d'inoculation avec de l'alcool si vous utilisez du sparadrap.
Recouvrez d'une deuxième couche de sparadrap après injection.
Replacez l'aluminium sur le pot, et entreposer celui-ci au noir et au chaud(25° Celsius idéalement), mais la température ambiante d'une pièce convient également.
Afin d'améliorer la stérilité, et si vous disposez d'une cuisinière à gaz, sachez qu'autour de la flamme il existe un cône de stérilité d'une vingtaine de centimètres et qu'il vous est possible d'effectuer des manipulations précédentes à proximité de ladite flamme.
Encore une fois le mélange flamme/alcool est explosif,méfiance !
Laissez faire le temps, et au bout de quelques jours vous devriez voir la formation d'un nuage de mycélium.
au fur et à mesure que le mycélium grandit, la culture liquide a tendance à pâlir.
Contaminations
Toute apparition d'un trouble, de particules en suspension, de bulles, encore plus de moisissures vertes ou colorées signe la contamination de votre culture liquide. Dans ce cas, injecter une bonne dose d'eau de Javel, laisser reposer quelques minutes et jeter votre culture liquide aux toilettes.
Exemple de cultures liquides contaminées
Votre culture liquide est maintenant prête et vous pouvez en prélever à l'aide d'une seringue avec une aiguilles de gros diamètre en passant soit par le polyfil, soit par le trou recouvert de sparadrap microporeux(dans ce cas passer le sparadrap à l'alcool avant de piquer)et en ayant soin de recouvrir le trou de prélèvement par une deuxième couche de sparadrap immédiatement après prélèvement.
une seringue de 20 ml de culture liquide permet d'ensemencer une vingtaine de pots à raison d'1 ml par pot.
Veillez à bien agiter la seringue avant utilisation.
Veillez également à bien désinfecter l'aiguille en la chauffant au rouge ou en la passant à l'alcool avant d'inoculer un pot.
Conservation de la culture liquide :
le pot de culture liquide ainsi que les seringues contenant de la culture liquide se conservent plusieurs mois, voire années au réfrigérateur.
Variantes dans la réalisation des cultures liquides :
Le silicone
la culture liquide n'a pas besoin d'une grande quantité d'oxygène pour se développer, il n'est donc pas indispensable d'utiliser du polyfil ou du sparadrap microporeux qui servent juste à favoriser les échanges gazeux.
il est possible de boucher le trou de prélèvement à l'aide de silicone résistant à la température.
Cela facilite le secouage de la solution et le morcellement du mycélium afin de faciliter le prélèvement, ce qui est très pratique si l'on ne dispose pas d'aiguilles très grosses.
Avec le silicone, il n'est pas besoin d'utiliser une bille.
En cas d'utilisation du silicone, il est impératif de veiller avant stérilisation, à ne pas visser complètement et hermétiquement le couvercle.
Dans le cas contraire, en refroidissant, il se créerait un vide dans le pot et lors de l'ouverture de celui-ci pour introduire les spores, il y aurait un important appel d'air qui risquerait d'introduire des contaminants.
Il faut donc, visser complètement le couvercle après complet refroidissement sans enlever l'aluminium.
Bien évidemment le prélèvement s"effectue alors en piquant l'aiguille au travers du silicone.
Petit conseil: dans ce cas l'étanchéité est totale et pour éviter tout phénomène de vide se créant à l'intérieur du pot et rendant l'aspiration difficile, je vous conseille d'injecter dans le pot la même quantité d'air stérile que le volume de culture liquide à soutirer.
Pour avoir de l'air stérile, vous pouvez mettre le bout de votre aiguille dans une flamme et aspirer doucement.
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